周小培先生1920年生于扬州一个普通的家庭，15岁从艺，师从叶东成，周殿魁，由于他勤奋好学，加之天资聪明，很快就成了年青的挑大梁的演员，在四十年代及解放初期，就在上海、南京、扬州、镇江等地，有了很大的影响，并深受广大扬剧观众的喜爱。
1953年加盟苏北实验扬剧团（1954年改为江苏省扬剧团）。1958年应文化部邀请，周小培随江苏省扬剧团到北京怀仁堂，为党和国家领导人演出《挑女婿》、《断桥》等剧目，受到了周总理等党和国家领导人的亲切接见，并合影留念。1957年在《恩仇记》中周小培扮演的邓炳如一角，在华东五省一市的汇演中荣获二等奖。周小培从艺七十年来，在艺术的长河中不断耕耘，勇于创新，特别是在扬剧小生的声腔方面有了较大的发展和创造，独树一帜，自成一派，并被同行和观众认可和喜爱，也被称为“周派”。他主攻小生，其嗓音高亢圆润，字正腔圆，舒展流畅，悦耳动听，声情并茂，感人至深。在几十年的从艺生涯中成功地塑造了梁山伯、邓炳如、许仙、申贵生等鲜活的正反面小生人物形象，他演唱的《单下山》受到扬剧观众较高的赞誉，多年来一直被同行与戏迷票友传唱，经久不衰。
周小培是扬剧界第一批著名演员，曾被媒体和观众誉为扬剧泰斗。
2004年5月22号邗江区文体局在扬州大剧院举办了“周小培从艺七十周年戏曲名家名段大型演唱会”，周小培先生以85岁的高龄参加了演出，整个演出十分精彩，盛况空前。晚会为周小培先生辉煌的艺术人生画上了一个圆满的句号。
周小培于2006年4月29日，因病久治无效辞世，享年86岁。
